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8-27
細胞培養(yǎng)常規(guī)方法1.凍存細胞的復蘇應遵守慢凍快融的原則。先將水浴鍋調(diào)至37-37。5度，取出凍存的細胞迅速放入后將細胞面浸至水面以下不斷搖動至融化。在無菌臺內(nèi)將*培養(yǎng)基加入50ml的小培養(yǎng)瓶內(nèi)，約5ml左右，然后用無菌吸管從凍存管內(nèi)取出細胞，置培養(yǎng)并內(nèi)輕輕搖晃，使細胞均勻后置培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)。2.傳代:對于貼壁細胞應先吸(倒)盡培養(yǎng)基，吸的越干凈越好，以免中和后加入的消化液，使強度減弱（或PBS洗1－3次）。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml，按此比例進行消化，(根據(jù)經(jīng)驗)，晃...
7-2
人體細胞是人體結(jié)構(gòu)和生理功能的基本單位，是生長、發(fā)育的基礎。人體細胞形態(tài)多樣,有球形、方形、柱狀形等。其大小差異很大,大多數(shù)細胞直徑僅有幾個微米,有的可達到100微米以上。盡管細胞的形態(tài)、大小各異,但其結(jié)構(gòu)基本相同。人體細胞約有40萬億—60萬億個，細胞的平均直徑在5—200微米之間。除成熟的紅血球和血小板外，所有細胞都至少有一個細胞核，是調(diào)節(jié)細胞生命活動、控制分裂、分化，遺傳，變異的控制中心。人體由體細胞和生殖細胞組成：人體細胞初由1個成熟受精卵細胞開始,分裂為2個細胞,繼...
6-30
建議在無菌條件下采用下列方法進行恢復培養(yǎng)。方法一:1、用浸過75%酒精的脫脂棉團擦凈安瓿表面。2、待安瓿表面酒精揮發(fā)后，將安瓿的封口端移至酒精燈火焰上加熱。3、用無菌水滴至加熱的安瓿頂端使玻璃破裂。4、用無菌鑷子敲開安瓿頂端。5、用無菌吸管加入0、3～0、5ml的液體培養(yǎng)基于安瓿管內(nèi)，使凍干菌種溶解呈懸浮液。6、混勻后，將懸浮液移植于液體培養(yǎng)基中或固體瓊脂上，在適宜溫度等條件下培養(yǎng)。方法二:1、用三棱鋼銼在封口下約2cm處橫銼安瓿。2、用浸過75%酒精的脫脂棉團擦凈安瓿表面。...
6-28
1冷凍管應如何解凍?取出冷凍管后，須立即放入37°C水槽中快速解凍，輕搖冷凍管使其在1分鐘內(nèi)全部融化，并注意水面不可超過冷凍管蓋沿，否則易發(fā)生污染情形。另冷凍管由液氮桶中取出解凍時，必須注意安全，預防冷凍管之爆裂。2細胞冷凍管解凍培養(yǎng)時，是否應馬上去除DMSO?除少數(shù)特別注明對DMSO敏感之細胞外，絕大部分細胞株(包括懸浮性細胞)，在解凍之后，應直接放入含有10-15ml新鮮培養(yǎng)基之培養(yǎng)角瓶中，待隔天再置換新鮮培養(yǎng)基以去除DMSO即可，如此可避免大部分解凍后細胞無法生長或貼附...
6-15
標準菌株是屬于種屬鑒定的規(guī)范參照菌，而質(zhì)控菌株，往往是從功能或用途上講的，通常是以標準菌株用來做質(zhì)控的。標準菌株使用注意事項：1、選擇合適的培養(yǎng)基：勿使用選擇性培養(yǎng)基。一般使用非選擇性的增菌培養(yǎng)基，因為微生物在選擇性培養(yǎng)基中生長某些生物特性可能丟失，保藏的菌種的生物特性可能與標準菌株特性不同。2、菌液的濃度：菌液的濃度一般越大，菌種保存時間越長。保藏時細菌常使用菌液，霉菌常用無菌水或生理鹽水制備成的孢子懸液。3、甘油濃度：甘油終濃度一般為10%~20%。由于甘油原液太粘稠，需...
6-15
菌種是從事微生物學及生命科學研究的基本材料，在醫(yī)學領域中，診斷制品的制備，菌苗的生產(chǎn)、微生物致病性研究。1、梭氏法將容有1滴細胞懸液的小管﹐置于盛有氫氧化鉀或五氧化二磷吸水劑的大試管中﹐用真空泵抽至1、3帕時﹐將大試管密封保存。這是為減少細胞死亡率而采取的一種不經(jīng)凍結(jié)﹑緩慢脫水的干燥保藏法﹐適用于多種細菌﹑真菌。2、冷凍真空干燥法將細胞懸液每0、1~0、2毫升注入一無菌安瓿瓶﹐于-40℃預凍1小時﹐再于-20~30℃﹑真空度為13、3帕的條件下脫水。在脫水過程后期﹐安瓿瓶外溫...
4-20
所有體外培養(yǎng)細胞，包括初代培養(yǎng)及各種細胞系，當生長達到一定密度后，都需做傳代處理。傳代的頻率或間隔與培養(yǎng)液的性質(zhì)、接種細胞數(shù)量和細胞增殖速度等有關。接種細胞數(shù)量大、細胞基數(shù)大、相同增殖速度條件下，細胞數(shù)量增加與飽和速度相對要快（實際上細胞接種數(shù)量大時細胞增殖速度比稀少時要快）。連續(xù)細胞系和腫瘤細胞系比初代培養(yǎng)細胞增殖快，培養(yǎng)液中血清含量多時細胞增殖比少時快。以上情況都會縮短傳代時間。所謂細胞“一代”一詞，系僅指從細胞接種到分離再培養(yǎng)時的一段時間，這已成為培養(yǎng)工作中的一種習慣說...
4-11
細胞株和細胞系的區(qū)別，列表說明我來答這么龍厄爾尼諾LV.12019-02-24聊聊細胞株和細胞系的區(qū)別：一、概念不同1、細胞株：細胞株是通過選擇法或克隆形成法從原代培養(yǎng)物或細胞系中獲得具有特殊性質(zhì)或標志物的培養(yǎng)物稱為細胞株（CellStrain）。2、細胞系：細胞系（cellline）指原代細胞培養(yǎng)物經(jīng)*傳代成功后所繁殖的細胞群體。也指可長期連續(xù)傳代的培養(yǎng)細胞。二、形成方法不同1、細胞株：通過選擇法或克隆形成法從原代培養(yǎng)物或細胞系中獲得具有特殊性質(zhì)或標志物的培養(yǎng)物成為細胞株。...
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